Preview

Фармакокинетика и Фармакодинамика

Расширенный поиск

Исследование хронической токсичности и противовоспалительных свойств препарата Дилепт

Полный текст:

Аннотация

Проведено изучение хронической токсичности препарата Дилепт при ежедневном пероральном введении в течение 6 месяцев в дозах 16 мг/кг и 160 мг/кг самцам и самкам крыс и кроликов. Развёрнутое клинико-лабораторное исследование не выявило токсических эффектов препарата за исключением обратимых дистрофических явлений в почках, печени, сердце, обратимого увеличения содержания креатинина в моче и дегенеративных форм эритроцитов у крыс, получавших препарат в дозе 160 мг/кг. Оценка противовоспалительных свойств Дилепта в реакции воспаления на конканавалин А показала, что Дилепт в дозах 0,1 и 10 мг/кг при в/б введении мышам проявляет выраженную противовоспалительную активность. У Дилепта не выявлено аллергизирующих свойств.

Для цитирования:


Алексеева С.В., Сорокина А.В., Мирошкина И.А., Кузнецова О.С., Коваленко Л.П., Дурнев А.Д. Исследование хронической токсичности и противовоспалительных свойств препарата Дилепт. Фармакокинетика и Фармакодинамика. 2016;(3):58-66.

For citation:


Alekseeva S.V., Sorokina A.V., Miroshkina I.A., Kuznestova O.S., Kovalenko L.P., Durnev A.D. Experimental study of chronic toxicity and anti-inflammatory properties of the drug Dilept. Pharmacokinetics and Pharmacodynamics. 2016;(3):58-66. (In Russ.)

Введение

Дилепт, метиловый эфир N-капроил-L-пролил- L-тирозина —оригинальный дипептидный атипичный нейролептик, разработанный в ФГНБУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова». В основе химической структуры лежит аминокислотная последовательность Pro-Tyr, фрагмент нейротензина —эндогенного тридекапептида, играющего важную роль в патогенезе шизофрении [1].

Дилепт обладает антипсихотической активностью, а также проявляет положительный мнемотропный эффект, что позволяет прогнозировать его эффективность не только в отношении негативной симптоматики шизофрении, а также при купировании психотических расстройств при болезни Альцгеймера [2].

Необходимым этапом разработки Дилепта явилась доклиническая оценка его безопасности.

Цель исследования

Оценка хронической токсичности Дилепта, а также его аллергизирующих и противовоспалительных свойств.

Материалы и методы

Хроническую токсичность Дилепта оценивали на самцах и самках беспородных белых крыс массой 180—200 г и кроликах породы шиншилла массой 1,5—2 кг.

Аллергизирующие свойства Дилепта исследованы в экспериментах на морских свинках альбиносах массой 250—300 г, противовоспалительные эффекты на мышах СВА массой 18—20 г.

Все животные были получены из сертифицированных питомников и содержались в условиях вивария ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова» при свободном доступе к воде и корму.

При оценке хронической токсичности препарат в виде суспензии на 1% крахмале вводили крысам и кроликам перорально 1 раз в сутки в течение шести месяцев в дозе, соответствующей терапевтической — 16 мг/кг и превышающей её в десять раз —160 мг/кг. При оценке аллергенности препарат использовали в тех же дозах по стандартным схемам иммунизации, в экспериментах по выявлению противовоспалительной активности Дилепт вводили в/б дозах 0,1 и 10 мг/кг.

Объём и продолжительность исследования, набор использованных методов, регистрируемых параметров и другие условия проведения исследования регламентировались соответствующим Руководством [3]. В экспериментах использовали современное лабораторное оборудование, прошедшее соответствующую поверку; электрокардиограф ЭК 1Т-03М, гемоанализатор (Лаборскель), установка «Открытое поле». Биохимический анализатор Stat Fax, анализатор мочи Clinitek Status, компьютеризированная система микроскопии МЕКОС-Ц1 и др.

Все анализы выполнялись до начала эксперимента, через 3 и 6 месяцев, не позже 24 ч после последнего введения препарата, за исключением «отставленной» группы, в которой измерения выполняли через 30 дней после последнего введения препарата.

Всех животных опытных и контрольных групп подвергали патологоанатомическому вскрытию с последующей оценкой микроскопической картины важнейших внутренних органов.

Изучение аллергизирующих и противовоспалительных свойств Дилепта проводили согласно методическим рекомендациям [4].

Статистический анализ полученных данных проводили с использованием программы Statistica 10.

Результаты выражали в виде средней арифметической и её средней ошибки, проверку данных на нормальность распределения выборок определяли по критерию Шапиро-Уилка, статистическую обработку экспериментальных данных проводили с помощью непарного t-критерию Стьюдента.

Результаты и их обсуждение

В результате проведённого исследования установлено, что 6-месячное введение Дилепта крысам и кроликам обоего пола в дозах 16 и 160 мг/кг перорально не вызывает выраженных изменений массы тела, общего состояния и поведенческих реакций животных в тесте «открытое поле». Дилепт не влияет на биохимические показатели сыворотки крови экспериментальных животных и физико-химические свойства мочи у крыс, за исключением увеличения содержания креатинина в моче, которое имеет обратимый характер. Дилепт в использованных дозах не вызывает выраженных изменений показателей ЭКГ. В ходе эксперимента не установлено влияния препарата на ритм, глубину и частоту дыхания у исследованных животных.

Дилепт не оказывает повреждающего действия на систему крови, за исключением появления дегенеративных форм эритроцитов у крыс, получавших препарат в дозе 160 мг/кг. Так, в крови самцов и самок отмечалось уменьшение количества дискоидных нор- моцитов и появление пойкилоцитных форм (рис. 1), у самцов число анизохромных эритроцитов было значимо выше контрольного показателя (рис. 2). Однако выявленные изменения были обратимы и не наблю-дались у крыс «отставленной» группы, исследованных через месяц после отмены препарата (табл. 1).

Описанные данные согласуются с результатами гистологических исследований селезёнки, где обнаружено значительное увеличение содержания гемосидерина, пигмента, образующегося при ускоренном распаде эритроцитов и выбросе гемоглобина.

Кроме того, после шестимесячного введении препарата в дозе 160 мг/кг отмечены дистрофические процессы различной степени выраженности в печени (рис. 3), почках (рис. 4) и сердце, однако, как показали исследования животных «отставленной» группы эти изменения носят обратимый характер.

При изучении аллергизирующих свойств Дилепта было установлено, что его введение в дозах 16 и 160 мг/кг не приводило к усилению реакции общей анафилаксии у животных опытных групп на белок куриного яйца (БКЯ). При иммунизации морских свинок Дилептом в дозах 16 и 160 мг/кг в смеси с полным адъювантом Фрейнда аллергических реакций не обнаружено. Однократное введение Дилепта в дозе 16 мг/кг не оказывало значимого влияния на реакцию воспаления на конканавалин А (Кон А). Однократное пероральное введение препарата в дозе 160 мг/кг вы-зывало выраженное подавление реакции воспаления на Кон А на 42,9%.

Таким образом, Дилепт при введении в дозах 16 мг/кг и 160 мг/кг не вызывает аллергических реакций немедленного и замедленного типа и псевдоаллергических реакций и оказывает противовоспалительное действие при пероральном введении в дозе 160 мг/кг.

Известно, что при хронизации воспалительного процесса возникает усиление синтеза провоспалительных цитокинов, нарушение баланса Th1 и Th2 хелперов, что приводит к выраженным неврологическим нарушениям и онкологическим заболеваниям. В последние годы накопилось достаточное количество данных, свидетельствующих о вовлеченности воспалительных реакций в патогенез психических и нейродегенеративных заболеваний, в частности повышение содержания провоспалительного ИЛ-6 у пациентов с болезнью Альцгеймера и Паркинсона может служить молекулярным диагностическим маркером этих заболеваний [7, 8]. Участие воспаления в патогенезе и симптомообразовании болезни Альцгеймера и Паркинсона, предполагает необходимость исследования потенциальных терапевтических возможностей противовоспалительных препаратов при этих заболеваниях. В связи с этим, для нейролептиков актуально наличие сопряжённой противовоспалительной активности.

При изучении противовоспалительной активности в реакции воспаления на Кон А препарата Дилепт, который вводили в/б однократно в дозах 0,1 мг/кг и 10 мг/кг, и препарат сравнения Диклофенак, который вводили в/б в дозе 10 мг/кг, было установлено, что Дилепт обладает выраженной противовоспалительной активностью по сравнению с препаратом сравнения Диклофенак (рис. 5).

Таким образом, 6-месячное изучение хронической токсичности препарата Дилепт при пероральном введении в дозах 16 и 160 мг/кг в не выявило токсических эффектов препарата за исключением дистрофических явлений в почках, печени и сердце и появления дегенеративных форм эритроцитов и увеличения содержания креатинина в моче у крыс, получавших препарат в дозе 160 мг/кг. Указанные изменения имели обратимый характер. При введении препарата в дозах 16 мг/кг и 160 мг/кг не обнаружено аллергических реакций немедленного и замедленного типа и псевдоаллергических реакций. Дилепт в малых дозах при в/б введении обладает выраженной противовоспалительной активностью, что, возможно, является составляющей его комплексного нейротропного действия.

Список литературы

1. Грушевская Л.Н., Гусев М.В., Блынская Е.В. и др. Разработка состава, технологии изготовления и стандартизации твердой дозированной лекарственной формы нового атипичного нейролептика. Дилепта Вестн. Моск. Ун-та. Серия 2. Химия, 2013; 54: 5: 288-294.

2. Шубенина Е.В., Островская Р.У., Кудрин В.С. и др. Экспериментальное изучение влияния дипептидного аналога нейротензина Дилепта на дофаминергические системы прилежащего ядра головного мозга. Казанский медицинский журнал. 2011; 92: 3: 408-411.

3. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Методические указания по изучению общетоксического действия фармакологических веществ. М.: 2005; 41-54.

4. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Методические рекомендации по оценке аллергизирующих свойств лекарственных средств. М.: 2012; 51-63.

5. Хлопушина Т.Г., Кринская А.В., Коваленко Л.П. и др. -Влияние зиксорина на фармакокинетику антипирина у интактных и сенсибилизированных морских свинок. Бюл. экспер. биол. 1991; 7: 67-69.

6. Kimber I., Kerkvliet N.I., Taylor S.L. et al. -Toxicology of protein allergenicity: prediction and characterization. Toxicol. Sci. 1999; 48: 157-162.

7. Андросова Л.В., Михайлова Н.М., Зозуля С.А. и др. Маркеры воспаления при шизофрении позднего возраста. Журнал неврологии и психиатрии. 2014; 12: 60-64.

8. Торган Т.И. Воспалительные механизмы синдрома усталости при болезни Паркинсона. Автореферат канд дисс. мед. наук, Пермь, 2013.


Об авторах

С. В. Алексеева
ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова»
Россия


А. В. Сорокина
ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова»
Россия


И. А. Мирошкина
ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова»
Россия


О. С. Кузнецова
ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова»
Россия


Л. П. Коваленко
ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова»
Россия


А. Д. Дурнев
ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова»
Россия


Для цитирования:


Алексеева С.В., Сорокина А.В., Мирошкина И.А., Кузнецова О.С., Коваленко Л.П., Дурнев А.Д. Исследование хронической токсичности и противовоспалительных свойств препарата Дилепт. Фармакокинетика и Фармакодинамика. 2016;(3):58-66.

For citation:


Alekseeva S.V., Sorokina A.V., Miroshkina I.A., Kuznestova O.S., Kovalenko L.P., Durnev A.D. Experimental study of chronic toxicity and anti-inflammatory properties of the drug Dilept. Pharmacokinetics and Pharmacodynamics. 2016;(3):58-66. (In Russ.)

Просмотров: 21


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2587-7836 (Print)
ISSN 2686-8830 (Online)