Клиническая фармакокинетика оригинального дипептидного анксиолитика ГБ-115

Введение

В ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова» создан новый ретропептидный аналог эндогенного тетрапептида холецистокинина — амид –N- фенил-гексаноил-глицил- L -триптофана (шифр ГБ-115) с выраженной анксиолитической активностью, доказанной на моделях тревожности в опытах in vivo при парентеральном и пероральном способах введения [3, 6]. Соединение ГБ-115 принадлежит к труднорастворимым веществам, что определяет отсутствие корреляции дозы и фармакологической активности, обусловленное низкой биодоступностью. Для повышения растворимости ГБ-115 с использованием сверхкритической флюидной технологии была проведена микронизация субстанции ГБ-115, что позволило уменьшить размер частиц до 10 мкм [10]. При сопоставлении фармакокинетики и фармакологической активности ГБ-115 в виде кристаллической и микронизированной субстанций у беспородных крыс показано, что микронизация способствовала значительному повышению биодоступности [4, 7]. Далее, при анализе соотношения фармакокинетика— фармакодинамика ряда фармацевтических композиций, приготовленных на основе микронизированной субстанции, была отобрана наиболее оптимальная композиция, обладающая лучшими фармакокинетическими параметрами и выраженной анксиолитической активностью, что позволило рекомендовать её для создания твёрдой лекарственной формы [5]. Исследование фармакокинетики ГБ-115 в плазме крови кроликов после однократного введения таблеток, приготовленных на основе микронизированной субстанции, показало, что относительная биодоступность таблеток ГБ-115 в среднем составила 128,18±36,07% по сравнению с субстанцией [8].

Цель настоящего исследования — изучить фармакокинетику разработанной таблетированной лекарственной формы ГБ-115 после однократного приёма в дозах 1, 3, 7, 11 и 15 мг на здоровых добровольцах.

Материал и методы

Фармакокинетика таблетированной формы ГБ-115 изучена в рамках проводимого открытого клинического исследования I фазы препарата по стандартизированному протоколу на 15 добровольцах после однократного приёма внутрь в дозах 1, 3, 7, 11, 15 мг.

Для этого добровольцев разделили на пять групп: 1-я группа — 3 человека, доза ГБ-115 — 1 мг (№/№ 01, 04, 06); 2-я группа — 3 человека, доза ГБ-115 — 3 мг (№/№ 07, 11, 12), 3-я группа — 3 человека, доза ГБ-115 — 7 мг (№/№ 08, 09, 13), 4-я группа — 3 человека, доза ГБ-115 — 11 мг (№/№ 15, 16, 18) и 5-я группа — 3 человека, доза ГБ-115 — 15 мг (№/№ 19, 20, 22). Каждому добровольцу на 8 ч в локтевую вену устанавливали кубитальный катетер. После установки катетера до приёма препарата отбирали контрольную пробу крови («К-проба»). Образцы крови (10,0 мл) отбирали и переносили в гепаринизированные конические полиэтиленовые пробирки. Отбор образцов крови осуществлялся в дискретные интервалы времени через: 0,25; 0,5; 0,75; 1,0; 1,5; 2,0; 4,0; 6,0 и 8,0 ч. Количественное определение ГБ-115 проводилось с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией [8].

Полученные данные подвергали математической статистической обработке. В таблице, где приведены фармакокинетические параметры ГБ-115 в плазме крови добровольцев после однократного приёма таблеток ГБ-115 в дозах от 1 до 15 мг, представлены средние арифметические значения (х), соответствующие им стандартные отклонения (SD), коэффициенты вариации (C.V.%). Для расчётов фармакокинетических параметров был использован модельно-независимый метод [1].

Результаты и обсуждение

Хромато-масс-спектрометрический анализ всех образцов плазмы крови добровольцев показал, что в анализируемых образцах присутствует характеристический молекулярный ион, соответствующий неизменённой молекуле ГБ-115, с m/z = 435,5 (протонированный ион). Поэтому дальнейший анализ проб плазмы крови проводили по данному характеристическому иону.

На рис. 1 представлены усреднённые фармакокинетические профили ГБ-115 в плазме крови добровольцев после однократного перорального приёма таблеток ГБ-115 в дозах 1, 3, 7, 11 и 15 мг. 

Из рис. 1 видно, что снижение концентраций исследуемого лекарственного вещества носит монофазный характер. В зависимости от дозы ГБ-115 определялся в плазме крови всех 15 добровольцев в течение 2—6 ч после однократного приёма лекарственного средства.

В таблице представлены фармакокинетические параметры ГБ-115 в плазме крови добровольцев после однократного приёма таблеток ГБ-115 в дозах от 1 до 15 мг.

Как видно из таблицы, большинство рассчитанных фармакокинетических параметров представляют собой сильно вариабельные величины. Так, коэффициент вариации (C.V.%) для Cmax (максимальная концентрация) колебался от 17,51% для дозы 7 мг до 61,19% для дозы 11 мг. C.V.% Tmax (время достижения максимальной концентрации) для дозы 3 мг составил 15,75% и для дозы 15 мг — 44,41%. Фармакокинетические параметры независящие от дозы — kel (константа скорости элиминации из плазмы крови), T1/2 (период полувыведения), MRT (среднее время удержания в организме) были менее вариабельны. Так, C.Y% MRT изменялся от 2,74% для дозы 7 мг до 20,96% для дозы 15 мг.

Анализ фармакокинетических параметров показал, что ГБ-115 быстро всасывается в системный кровоток из желудочно-кишечного тракта добровольцев. Так, время достижения Сmах — Тmах ГБ-115 в плазме крови в среднем изменялось от 0,83+0,14 ч (доза 1 мг) до 1,42+0,63 ч (доза 15 мг). Изучаемое соединение всасывается из желудочно-кишечного тракта после однократного перорального приёма различных доз таблеток ГБ-115 (3, 7, 11 и 15 мг) примерно с одинаковой скоростью (Cmax/AUC0-T (ч-1) — параметр, характеризующий скорость всасывания препарата в системный кровоток). Величины Cmax/AUC0_T составили 0,482—0,552 ч^—1. Исключение составляет величина Cmax/AUC0-T после однократного перорального приёма таблеток ГБ-115 в дозе 1 мг (0,975 ч—1).

Величины Сmах в среднем изменялись от 7,29+ ±2,83 нг/мл (доза 1 мг) до 44,02+13,23 нг/мл (доза 15 мг). При этом индивидуальные значения Tmax колебались от 0,75 до 2,0 ч.

ГБ-115 достаточно быстро выводится из плазмы крови. Так, период полувыведения (T 1/2) исследуемого вещества в среднем колебался от 0,57+0,07 ч для дозы 1 мг до 1,06+0,06 ч для дозы 3 мг.

Площадь под фармакокинетической кривой (AUC0-T) ГБ-115 возрастала с увеличением дозы: для дозы 1 мг — 7,48+3,14; 3 мг — 16,86+3,12; 7 мг — 37,12+8,93; 11 мг — 61,98+32,69 и для 15 мг — 84,38+27,13 нг/мл х ч.

Обобщая полученные результаты, можно говорить о том, что при последовательном, линейном увеличении дозы ГБ-115 с 1 до 15 мг происходит увеличение дозозависимых фармакокинетических параметров. Данный тезис подтверждается рис. 2, где представлена графическая зависимость логарифма исследуемых доз (lg доза — ось абсцисс) от логарифма площади под фармакокинетической кривой (lg AUC — ось ординат). Из уравнения на рис. 2 видно, что показатель b, характеризующий наклон кривой, приближается к 1 (0,8995).

Общий плазменный клиренс (Cl/F) ГБ-115 в диапазоне доз 1—15 мг изменялся от 1,987+0,824 до 2,788+1,560 л/ч/кг.

Параметром, характеризующим степень проникновения лекарственного вещества в ткани, является кажущийся объём распределения (Vd/F). Его величина для ГБ-115 после перорального введения в дозах 1—15 мг составила в среднем 2,47 л/кг. Кажущийся объём распределения обычно неэквивалентен анатомическому объёму, а отражает распределение препарата и степень его связывания в организме. Так, если препарат связывается преимущественно белками крови, Vd/F будет меньше, чем реальный объём жидкости. С другой стороны, преимущественное связывание препарата во внесосудистом пространстве приводит к превышению значения Vd/F над реальным объёмом жидкости [9, 12]. В нашем случае расчёт величин Vd/F дал значительно большие результаты, указывающие, что ГБ-115 распределяется во всех жидких средах организма и, возможно, накапливается в тканях.

Сравнение дозонезависимых фармакокинетических параметров ГБ-115 и других дипептидных препаратов, таких как дилепт, ноопепт, у добровольцев, выявило следующие различия: дилепт достигает максимальной концентрации в плазме крови в среднем через 0,4 ч после приёма препарата, для ноопепта этот параметр составил в среднем 0,5 ч [2, 11]. В то же время для ГБ-115 средняя величина Tmax составила 0,85 ч.

Сопоставление величин параметров, характеризующих скорость выведения, показало, что T 1/2el дилепта в 3 раза превышал аналогичный параметр, полученный для ГБ-115 (1,9 и 0,6 ч, соответственно). MRT дилепта у добровольцев было в 1,7 раза больше, чем после однократного приёма таблеток ГБ-115 (3,1 и 1,8 ч, соответственно). Таким образом, лекарственные средства, относящиеся к группе дипептидов, достаточно быстро всасываются из ЖКТ добровольцев и в то же время продолжительно циркулируют в системном кровотоке.

Выводы

1.На 15 добровольцах изучена фармакокинетика ГБ-115 после однократного приёма таблеток ГБ-115 в дозах 1, 3, 7, 11 и 15 мг. Лекарственное вещество быстро всасывается в системный кровоток. Величины Cmax/AUC0-T для доз 3—15 мг в среднем составили 0,482 — 0,552 ч-1. Величина кажущегося объёма распределения ГБ-115 после приёма доз 1-15 мг составила в среднем 2,47 л/кг, что указывает на его хорошее распределение в тканях и жидкостях организма; ГБ-115 достаточно быстро выводится из плазмы крови, на что указывает среднее значение периода полувыведения препарата (0,6—1,0 ч).

2.В изученном диапазоне доз фармакокинетика ГБ-115 имеет линейный характер.