Хроматографическое определение родственных примесей в субстанции оригинального соединения с противоэпилептической активностью ГИЖ-298: разработка и валидация методики

Актуальность. Для внедрения в медицинскую практику нового оригинального соединения под шифром ГИЖ-298, обладающего выраженной противосудорожной активностью в экспериментах in vivo, требуется проведение его всесторонней фармацевтической разработки. Одним из её ключевых этапов, обеспечивающим качество, безопасность и эффективность будущего лекарственного средства, является разработка методик контроля родственных примесей.

Цель работы. Разработка и валидация методики определения родственных примесей в субстанции нового оригинального противосудорожного соединения ГИЖ-298 методом ВЭЖХ-УФ.

Материалы и методы. Исследования выполнены на опытных образцах субстанции ГИЖ-298, а также на исходных, промежуточных и побочном продуктах её синтеза. Хроматографическое разделение проведено на жидкостном хроматографе Infinity 1260 (Agilent Technologies, США), оснащённом спектрофотометрическим детектором с переменной длиной волны, программное обеспечение Agilent OpenLAB CDS ChemStation. Стрессовые исследования для оценки специфичности проведены в условиях воздействия 0,1 М раствора HCl, 0,1 М раствора NaOH, 3 % раствора H₂O₂, а также при воздействии светового излучения в камере ATLAS SUNTEST CPS+ с системой охлаждения ATLAS SunCool (ATLAS MTT, США).

Результаты. Разработана методика определения родственных примесей в субстанции ГИЖ-298 методом ВЭЖХ-УФ на колонке BDS Hypersil C18 250 мм × 4,6 мм, 5 мкм (Agilent Technologies, США). Состав подвижной фазы: смесь 0,02 М раствора дикалия гидрофосфата с рH 7,45±0,05, ацетонитрила и метанола (250:100:100). Методика валидирована по следующим характеристикам: специфичность, линейность, предел обнаружения, предел количественного определения правильность и прецизионность (сходимость). Методика позволяет обнаруживать как известные технологические примеси на уровне 0,05 % и ниже, так и примеси, образующиеся в процессе гидролиза, окисления и фотодеструкции субстанции ГИЖ-298.

Заключение. Разработанная методика может быть использована для оценки содержания родственных примесей в фармацевтической субстанции ГИЖ-298 и лекарственных препаратах на её основе.

1. Epilepsy: a public health imperative. Summary. Geneva: World Health Organization; 2019 (WHO/MSD/MER/19.2). Licence: CC BY–NC–SA 3.0 IGO.

2. GBD Epilepsy Collaborators. Global, regional, and national burden of epilepsy, 1990-2021: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2021. Lancet Public Health. 2025 Mar;10(3):e203-e227. doi: 10.1016/S2468-2667(24)00302-5.

3. Дурнев А.Д., Воронина Т.А., Литвинова С.А. и др. Производные оксимов 4–бензоилпиридина, обладающие противосудорожной активностью, как средства для лечения эпилепсии и пароксизмальных состояний. Патент РФ № 2643091; 2018.

4. Ушкалова Е.А. Побочные эффекты противоэпилептических средств. Фарматека. 2001;(9-10):11.

5. Литвинова С.А., Наркевич В.Б., Гайдуков И.О. и др. Изучение влияния производного оксимов пиридина (ГИЖ–298) на содержание моноаминов и их метаболитов в структурах мозга крыс на фоне судорог, вызванных максимальным электрошоком. Нейрохимия. 2019;36(3):239-245.

6. Жмуренко Л.А., Мокров Г.В., Неробкова Л.Н. и др. Новое производное оксимов 4-бензоилпиридинов ГИЖ-298, обладающее противосудорожной активностью. Фармакокинетика и Фармакодинамика. 2017;(1):22-26.

7. Гайдуков И.О., Литвинова С.А., Воронина Т.А. и др. Влияние нового производного оксима 4-бензоилпиридина — ГИЖ-298 и вальпроевой кислоты на тревожное и депрессивноподобное состояния, когнитивные функции в эксперименте. Экспериментальная и клиническая фармакология. 2022;85(7):8-12.

8. ОФС.1.1.0023. Родственные примеси в фармацевтических субстанциях и лекарственных препаратах. Государственная фармакопея Российской Федерации. 15-е изд.

9. Требования к проведению исследований (испытаний) лекарственных средств в части оценки и контроля содержания примесей. Решение Коллегии ЕЭК от 04.10.2022 № 138.

10. ICH Harmonised Tripartite Guideline: Impurities in new drug substances Q3A(R2). In: Quality guidelines [Internet]. Geneva: ICH; 2006 [cited 2026 May 12]. Available from: https://ich.org/page/quality-guidelines.

11. ОФС.1.1.0012. Валидация аналитических методик. Государственная фармакопея Российской Федерации. 15-е изд.

12. ОФС.1.1.0029. Определение фотостабильности лекарственных средств. Государственная фармакопея Российской Федерации. 15-е изд.

13. Требования к исследованию стабильности лекарственных препаратов и фармацевтических субстанций. Решение Коллегии ЕЭК от 10.05.2018 № 69 (в ред. от 30.06.2020 № 86).

14. ОФС.1.1.0013. Статистическая обработка результатов физических, физико–химических и химических испытаний. Государственная фармакопея Российской Федерации. 15-е изд.

15. ОФС 2.3.13.0. Статистическая обработка результатов физических, физико–химических и химических испытаний. Фармакопея ЕАЭС, т. 2.