phkineticaФармакокинетика и ФармакодинамикаPharmacokinetics and Pharmacodynamics2587-78362686-8830ООО «Издательство ОКИ»10.24411/2587-7836-2019-10035phkinetica-82Research ArticleМЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯMECHANISM OF ACTIONИсследование протекторных свойств агониста TrkA-рецептора ГК-2 на модели окислительного стресса в культуре клеток сосудистого эндотелия человека (HUVEC)Research of neuroprotective properties of TrkA-receptor agonist GK-2 on model of oxidative stress in human vascular endothelial cells (HUVEC)АнтиповаТ. А.AntipovaT. A.noemail@neicon.ruНиколаевС. В.NikolaevS. V.cergej.nikolajev@gmail.comКрыжановскийС. А.KryzhanovskyS. A.noemail@neicon.ruПекельдинаЕ. С.PekeldinaE. S.noemail@neicon.ruФГБНУ «Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова»РоссияFSBI «Zakusov Institute of Pharmacology»Russian Federation201906012019011821Copyright © Антипова Т.А., Николаев С.В., Крыжановский С.А., Пекельдина Е.С., 20192019Антипова Т.А., Николаев С.В., Крыжановский С.А., Пекельдина Е.С.Antipova T.A., Nikolaev S.V., Kryzhanovsky S.A., Pekeldina E.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pharmacokinetica.ru/jour/article/view/82

Окислительный стресс приводил к достоверному снижению жизнеспособности клеток по сравнению с контролем (78±5 % и 100±6 % соответственно, р < 0,05). Внесение как ГК-2, так и NGF предотвращало снижение жизнеспособности клеток HUVEC под действием H2O2 (95±3 % для ГК-2 и 97±4 % для NGF против 78±5 % для H2O2, р < 0,05). В контроле количество клеток с конденсированным хроматином составило 9±2, после внесения Н2О2 78±9 (р < 0,05 по сравнению с контролем). Внесение NGF или ГК-2 после Н2О2 достоверно снижало число таких клеток (44±9 и 41±8 соответственно) (р < 0,05 по сравнению с перекисью водорода) и препятствовало развитию морфологических изменений ядерного хроматина. Таким образом, ГК-2, подобно NGF, в культуре клеток эндотелия человека HUVEC препятствует развитию процесса апоптоза, вызванного окислительным стрессом.

Oxidative stress resulted to decrease in cells viability compared to the control (78 ± 5 % and 100 ± 6 %, respectively, р < 0,05). GK-2 and NGF prevented H2O2-induced HUVEC cells damages (95 ± 3 % for HA-2 and 97 ± 4 % for NGF vs. 78 ± 5 % for H2O2, p < 0.05). In control the number of cells with condensed chromatin was 9 ± 2, after the addition of H2O2 78 ± 9 (p < 0.05 compared with the control). The addition of NGF or GK-2 after H2O2 significantly reduced the number of such cells (44 ± 9 and 41 ± 8, respectively) (p < 0.05 compared to hydrogen peroxide) and prevented the development of morphological changes in nuclear chromatin. Thus GK-2, like NGF, in human endothelial cell culture HUVEC prevented the apoptosis development caused by hydrogen peroxide.

NGFдимерный дипептидный миметик ГК-2HUVEC клетки эндотелия человекаокислительный стрессапоптозNGFdimeric dipeptide mimetic GK-2HUVECoxidative stressapoptosisReferencesПарфенова Е.В., Ткачук В.А. Терапевтический ангтогенез: достижения, проблемы, перспективы // Кардиологический вестник. – 2017. – Т. 2. – № 2(14). – С. 5–14. [Parfenova EV, Tkachuk VA. Therapeutic angiogenesis: advances, problems, prospects. Kardiologicheskij vestnik. 2007;2(2(14)):5–15. (In Russ).]Парфенова Е.В., Ткачук В.А. Терапевтический ангтогенез: достижения, проблемы, перспективы // Кардиологический вестник. – 2017. – Т. 2. – № 2(14). – С. 5–14. [Parfenova EV, Tkachuk VA. Therapeutic angiogenesis: advances, problems, prospects. Kardiologicheskij vestnik. 2007;2(2(14)):5–15. (In Russ).]Ko SH, Bandyk DF. Therapeutic angiogenesis for critical limb ischemia. Semin. Vasc. Surg. 2014;27:1:23–31.Ko SH, Bandyk DF. Therapeutic angiogenesis for critical limb ischemia. Semin. Vasc. Surg. 2014;27:1:23–31.Blais M, L vesque P, Bellenfant S, Berthod F. Nerve growth factor, brain-derived neurotrophic factor, neurotrophin-3 and glial-derived neurotrophic factor enhance angiogenesis in a tissue-engineered in vitro model. TissueEng. PartA. 2013;19(15–16):1655–1664.Blais M, L vesque P, Bellenfant S, Berthod F. Nerve growth factor, brain-derived neurotrophic factor, neurotrophin-3 and glial-derived neurotrophic factor enhance angiogenesis in a tissue-engineered in vitro model. TissueEng. PartA. 2013;19(15–16):1655–1664.Гудашева Т.А., Антипова Т.А., Середенин С.Б. Новые низкомолекулярные миметики фактора роста нервов // ДАН. – 2010. – Т. 434. – № 4. – С. 549–552. [Gudasheva TA, Antipova TA, Seredenin SB. Novel low-molecular-weight mimetics of the nerve growth factor. Doklady Biochemistry and Biophysics. 2010;434(4):549–552. (In Russ).]Гудашева Т.А., Антипова Т.А., Середенин С.Б. Новые низкомолекулярные миметики фактора роста нервов // ДАН. – 2010. – Т. 434. – № 4. – С. 549–552. [Gudasheva TA, Antipova TA, Seredenin SB. Novel low-molecular-weight mimetics of the nerve growth factor. Doklady Biochemistry and Biophysics. 2010;434(4):549–552. (In Russ).]Крыжановский С.А., Антипова Т.А., Цорин И.Б., и др. Ангиогенные эффекты димерного дипептидного миметика четвертой петли фактора роста нервов // Бюл. эксперим. биол. и медицины. – 2016. – Т. 161. – № 4. – С. 503–507. [Kryzhanovskii SA, Antipova TA, Tsorin IB. Angiogenic effects of dimeric dipeptide mimetic of loop 4 of nerve growth factor. Bulletin of Experimental Biology and Medicine. 2016;161(4):513–517. (In Russ).]Крыжановский С.А., Антипова Т.А., Цорин И.Б., и др. Ангиогенные эффекты димерного дипептидного миметика четвертой петли фактора роста нервов // Бюл. эксперим. биол. и медицины. – 2016. – Т. 161. – № 4. – С. 503–507. [Kryzhanovskii SA, Antipova TA, Tsorin IB. Angiogenic effects of dimeric dipeptide mimetic of loop 4 of nerve growth factor. Bulletin of Experimental Biology and Medicine. 2016;161(4):513–517. (In Russ).]Cai H, Harrison DG. Endothelial dysfunction in cardiovascular diseases:the role of oxidant stress. Circ. Res. 2000;87(10)840–844.Cai H, Harrison DG. Endothelial dysfunction in cardiovascular diseases:the role of oxidant stress. Circ. Res. 2000;87(10)840–844.Berry C, Brosnan MJ, Fennell JP, et al. Oxidative stress and vascular damage in hypertension. Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 2001;10(2):247–255.Berry C, Brosnan MJ, Fennell JP, et al. Oxidative stress and vascular damage in hypertension. Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 2001;10(2):247–255.Twentyman PR, Luscombe M. A study of some variables in a tetrazolium dye (MTT) based assay for cell growth and chemosensitivity. Br. J. Cancer. 1987;56:279–285.Twentyman PR, Luscombe M. A study of some variables in a tetrazolium dye (MTT) based assay for cell growth and chemosensitivity. Br. J. Cancer. 1987;56:279–285.Mu P, Liu Q, Zheng R. Biphasic regulation of H2O2 on angiogenesis implicated NADPH oxidase. CellBiologyInternational. 2010;34(10):1013–1020.Mu P, Liu Q, Zheng R. Biphasic regulation of H2O2 on angiogenesis implicated NADPH oxidase. CellBiologyInternational. 2010;34(10):1013–1020.Антипова Т.А. Нейропротекторное действие низкомолекулярного пептидного миметика фактора роста нервов NGF ГК-2 связано с активацией синтеза белков теплового шока HSP32 и HSP70 и увеличением фосфорилирования TrkA // Эксперим. и клин. фармакол. – 2010. – Т. 73. – № 12. – С. 6–8. [Antipova TA. Neuroprotective effect of lowmolecular peptide mimetic (GK-2) of nerve growth factor is related to activated synthesis of heat shock proteins (HSP32 and HSP70) and increased phosphorylation of TrkA receptor. Eksperim. i klin. Farmakol. 2010;73(12):6–8. (In Russ).] DOI: https://doi.org/10.30906/0869-2092-2010-73-12-6-8.Антипова Т.А. Нейропротекторное действие низкомолекулярного пептидного миметика фактора роста нервов NGF ГК-2 связано с активацией синтеза белков теплового шока HSP32 и HSP70 и увеличением фосфорилирования TrkA // Эксперим. и клин. фармакол. – 2010. – Т. 73. – № 12. – С. 6–8. [Antipova TA. Neuroprotective effect of lowmolecular peptide mimetic (GK-2) of nerve growth factor is related to activated synthesis of heat shock proteins (HSP32 and HSP70) and increased phosphorylation of TrkA receptor. Eksperim. i klin. Farmakol. 2010;73(12):6–8. (In Russ).] DOI: https://doi.org/10.30906/0869-2092-2010-73-12-6-8.Stankiewicz AR, Lachapelle G, Foo CP, et al. Hsp70 inhibits heatinduced apoptosis upstream of mitochondria by preventing Bax translocation. J. Biol. Chem. 2005;280(46):38729-38739.Stankiewicz AR, Lachapelle G, Foo CP, et al. Hsp70 inhibits heatinduced apoptosis upstream of mitochondria by preventing Bax translocation. J. Biol. Chem. 2005;280(46):38729-38739.Saleh A, Srinivasula SM, Balkir L, Robbins PD, Alnemri ES. Negative regulation of the APAF-1 apoptosome by HSP70. Nat. Cell Biology. 2000;2(8):476–483.Saleh A, Srinivasula SM, Balkir L, Robbins PD, Alnemri ES. Negative regulation of the APAF-1 apoptosome by HSP70. Nat. Cell Biology. 2000;2(8):476–483.Kalinowska M, Garncarz W, Pietrowska M, et al. Regulation of the human apoptotic DNase/RNase Endonuclease G: Involvement of Hsp70 and ATP. Apoptosis. 2005;10(4):821–830.Kalinowska M, Garncarz W, Pietrowska M, et al. Regulation of the human apoptotic DNase/RNase Endonuclease G: Involvement of Hsp70 and ATP. Apoptosis. 2005;10(4):821–830.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.